SLP-HS Single Reagent Set II

Dosage quantitatif du peptidoglycane (PG) et du (1->3)-β-D-glucane dans les préparations parentérales et actifs pharmaceutiques

Le SLP-HS Single Reagent Set Ⅱ est capable de détecter à la fois le peptidoglycane (PG) et le (1->3)-β-D-glucane (BDG). Le produit utilise un mécanisme d'autodéfense du ver à soie Bombyx mori qui entraîne un changement de couleur par la formation d'un pigment noir de mélanine en présence d'une contamination microbienne. Le PG étant présent dans toutes les parois cellulaires des bactéries et le BDG dans la plupart des champignons, le réactif SLP (plasma de larve de ver à soie) constitue une méthode très sensible et à large spectre pour la détection de la contamination microbienne.

CARACTÉRISTIQUES

  • Principio de prueba basado en el reactivo SLP (Silkworm Larvae Plasma)
  • Ensayo cinético colorimétrico
  • PG aislado de S. aureus utilizado como estándar
  • Límite de detección de BDG: 1pg/ mL
  • Límite de detección de PG: 10pg/ mL
  • Análisis automatizado mediante el software Toximaster®
  • Tiempo de medición: 120 minutos a 30 °C
  • Pruebas para la contaminación microbiana en el dializado y sus materias primas
  • Detección de compuestos fúngicos en productos farmacéuticos, dispositivos médicos, productos biológicos y productos de ingeniería genética
  • Investigación de contaminantes bacterianos en agua comercial
N° de Catalogue Nom du Produit Quantité
296-81001 SLP-HS Single Reagent Set II 20 testes

CONTENU DU KIT

1

Réactif SLP-HS II (réactif lyophilisé avec plasma de larve de ver à soie et DOPA) 

0.1 mL x 20 vials

2

Diluant pour SLP 
5.0 mL x 2 vials

3

Standard (peptidoglycane digéré de Staphylococcus aureus)
0.5 mL x 1 vial

 

SLP HS Single Reagent Set II Fig6.1

INTRODUCTION

L'hémolymphe du ver à soie Bombyx mori contient un mécanisme d'autodéfense, le système de cascade de la prophénoloxydase (Pro-PO), qui est déclenché par le peptidoglycane (PG) et le (1->3)-β-D-glucane (BDG), entraînant l'activation de la prophénoloxydase (PO) et la production d'intermédiaires toxiques contre les agents pathogènes envahissants.

Bien que le mécanisme exact ne soit pas encore totalement élucidé, il a été postulé que différentes protéases à sérine sont impliquées dans ce processus, conduisant au clivage de la Pro-PO inactive en PO active et à la formation de mélanine.

Le réactif SLP est un produit lyophilisé préparé dans des conditions stériles à partir de l'hémolymphe du ver à soie, contenant tous les facteurs impliqués dans le système de cascade de la Pro-PO. Lors de l'activation par le PG par les bactéries et le BDG par le fungi et la levure, la mélanisation se produit en deux étapes, par l'oxydation de la L-DOPA (L-3,4-Dihydroxyphénylalanine) en Dopachrome puis la conversion de ce dernier en pigment noir de mélanine, ce qui entraîne un changement de couleur de la solution.

Comme le PG est présent dans toutes les parois cellulaires des bactéries et le BDG dans la plupart des champignons, le réactif SLP constitue une méthode très sensible et à large spectre pour la détection de la contamination microbienne.

PRINCIPE DU TEST

Le réactif SLP réagit fortement avec le PG et le BDG, induisant la formation d'un pigment noir de mélanine qui peut être suivi soit par détection visuelle, soit quantitativement en mesurant l'absorbance à 650 nm.

Pour un test quantitatif, l'analyse peut être effectuée à l'aide du Toxinometer® ET-7000.

La quantification est obtenue par le suivi de la formation de mélanine en mesurant le temps d'activation (Ta) de la réaction, c'est-à-dire le moment où l'absorbance atteint un seuil prédéterminé. En corrélant la valeur mesurée à une courbe d'étalonnage générée précédemment avec un standard de PG, la concentration absolue de PG et de BDG peut être déterminée avec une sensibilité dans la gamme inférieure des pg/ml.

SLP HS Single Reagent Set II Fig4.2