Muitos biólogos encontram os termos "bactérias gram-positivas e gram-negativas", mas o que esses termos significam e quais são suas implicações para a saúde e as doenças humanas?
O teste de coloração de Gramfoi inventado em 1884 por Hans Christian Gram. O teste caracteriza bactérias com base na espessura da camada de peptidoglicano em sua parede celular. As bactérias gram-positivas têm uma camada peptidoglicana muito espessa, variando de 20 a 80 nm. Em contraste, a camada peptidoglicana de bactérias gram-negativas é muito mais fina, cerca de 8 nm.
O teste de Gram envolve várias etapas para classificar as bactérias nessas duas categorias. Primeiro, as células bacterianas são coradas usando um corante violeta de cristal. Em seguida, é adicionada uma solução de iodo de Gram, que forma um complexo com o corante. Posteriormente, é adicionado um agente de branqueamento, geralmente acetona ou álcool etílico, que diminui a camada de peptidoglicano.
Nas bactérias gram-positivas, o complexo corante-iodo não consegue penetrar na espessa camada de peptidoglicano, porque permanece preso dentro da célula. No entanto, em bactérias com uma fina camada de peptidoglicano, o complexo corante-iodo penetra na parede bacteriana, escapando da mesma. Assim, as bactérias gram-positivas retêm o corante violeta, enquanto as bactérias gram-negativas não.
Em seguida, um corante vermelho é adicionado às células. Como a cor vermelha é mais clara que a violeta, o tom vermelho não aparecerá nas células rotuladas como violeta. Somente as células que não retêm a tonalidade violeta aparecerão em vermelho.
Finalmente, é necessário apenas examinar as bactérias sob um microscópio para determinar sua classificação. As bactérias gram-positivas serão violetas, enquanto as bactérias gram-negativas serão vermelhas.
Existem muitos gêneros diferentes de bactérias gram-positivas e geralmente são diferenciadas por sua forma: esférica (cocos) ou em forma de bastonete (bacilos). As bactérias esféricas incluem o estafilococo, que causa infecções cutâneas, e o estreptococo, que causa várias doenças, como faringite estreptocócica, escarlatina e pneumonia.
As bactérias em forma de bastonete incluem Bacillus e Listeria. Estes podem causar infecções diferentes, como antraz, difteria e listeriose.
Assim como as gram-positivas, as bactérias gram-negativas representam uma ampla variedade de espécies diferentes. Além das bactérias esféricas e em forma de bastonete, as gram-negativas também possuem forma de espiral (espiroquetas).
As bactérias gram-negativas representam muitas doenças, incluindo muitas enfermidades transmitidas por alimentos, cólera, gonorreia e infecções do trato urinário.
Uma das características distintivas das bactérias gram-negativas é a capacidade de produzir endotoxinas. Endotoxinas são moléculas de lipopolissacarídeos na parede celular das bactérias. As endotoxinas são pirogênicas, portanto, podem causar febre (e às vezes reações mais perigosas, como sepse) em humanos.
As endotoxinas tornaram-se uma preocupação séria nos setores farmacêutico, biotecnológico e sanitário. Essas moléculas são extremamente estáveis em termos de temperatura, portanto não podem ser completamente removidas por autoclave. Portanto, mesmo amostras sem bactérias podem causar reações imunes perigosas.
Para evitar a contaminação por endotoxinas, os medicamentos e os dispositivos médicos devem ser cuidadosamente analisados usando o teste do lisado de Amebócito Límulus (LAL), que fornece uma estimativa quantitativa robusta dos níveis de endotoxinas.