Uso do Toxinometer ET-6000 nos ensaios de LAL

O Toxinometer® ET-6000 é o novo equipamento desenvolvido pela companhia Wako, para a leitura de tubos nos quais se está a realizar o ensaio de LAL (Lisado de Amebocitos de Limulus) para a quantificação de endotoxinas bacterianas numa amostra. O ensaio de LAL é hoje em dia considerado o método mais eficaz para a deteção de pirógenos, pois as endotoxinas bacterianas são os pirogéneos que se encontram mais comummente em amostras de fármacos e alimentos, entre outros.

No Toxinometer® ET-6000 os usuários poderão encontrar um sistema altamente flexível, com controlo total pelo computador. Este equipamento pode ser utilizado se quiser quantificar as endotoxinas em amostras pequenas ou de maior volume, adaptando-se facilmente com módulos de expansão quando o número de amostras com o qual o investigador precisa de trabalhar é muito grande.

O El Toxinometer® ET-6000 funciona mediante a medição da proporção de luz que passa pelo tubo no tempo, em comparação com a intensidade de luz que passa no momento de começar o ensaio. A reação dos amebócitos do caranguejo-ferradura (Limulus polyphemus) na presença de endotoxinas bacterianas provoca a coagulação das proteínas que atuam como defesa do sistema imune do caranguejo. O aparecimento dos coágulos provoca turbidez na amostra em estudo e alterando assim a intensidade da luz que atravessa a amostra, pelo que o princípio de funcionamento do toxinómetro é muito fácil. O tempo que demora a aparecer a turbidez na mistura no tubo é proporcional à quantidade de endotoxinas presente na amostra ou o standard que se está a medir. Quanto maior a concentração de endotoxinas (lipopolissacarídeos) numa amostra da reação do lisado de amebócitos mais rápido é produzida a reacção. Neste ensaio denomina-se tempo de reação ao tempo necessário para que a amostra de endotoxinas reaja com a mistura de reagentes de LAL.

Mediante a medição do tempo de reação pode-se usar o ET-6000 para conhecer a concentração de endotoxinas numa amostra. Se o ensaio turbidimétrico for usado, é medida a velocidade com que aparece a turbidez, para calcular o tempo de reação; no caso do ensaio cromogénico mede-se o aumento da intensidade da cor para calcular o tempo de reação.

O software Toximaster® QC7 é fornecido com o Toxinometer ET-6000 e é o que permite alcançar um trabalho de rotina eficiente e obter uma elevada qualidade na análise dos dados. Ao adquirir o equipamento o software já vem carregado para que se possa utilizar imediatamente depois da compra e que não seja um impedimento para a implementação imediata do equipamento. Também se pode encontrar uma compilação de software como parte da documentação que vem junta com o toxinómetro.

Vantagens do uso do Toxinometer ET-6000:

• É compatível com qualquer método usado para realizar o ensaio de LAL, cinético-turbidimétrico, cromogénico-cinético e gel-clot. São geradas cópias imprimíveis dos dados obtidos nas medições, que facilitam a análise dos mesmos.

• Num módulo simples podem-se medir simultaneamente até 16 amostras. Para medir uma maior quantidade de amostras, encontram-se disponíveis os módulos de expansão. Com o uso destes módulos são somadas 16 amostras por cada módulo que se agrega, até um máximo de 8 que permite a leitura de 128 amostras.

• Podem-se realizar medidas tanto a 30ºC como a 37ºC, com uma alta sensibilidade 0.001 EU/mL em aproximadamente 40 minutos.

• A determinação de endotoxina que se realiza usando o ET-6000 está de acordo com as normas de Farmacologia americana, a europeia e a japonesa para este tipo de ensaio, assim como as da FDA.

• O Toximaster QC7 é um software que integra os conhecimentos mais avançados neste tipo de produtos e que facilita o uso do equipamento, permitindo uma poupança de tempo e a deteção atempada de qualquer falha no equipamento.

ACESSÓRIOS E REAGENTES LAL:

Tubos de diluição livres de endotoxinas	PYROSTAR™ ES-F Único Teste Vial	Wako BioClean® Plates