Conversão de um reagente para outro

A entrega de dados reprodutíveis e precisos é um pré-requisito para a operação bem-sucedida de qualquer laboratório. Para atingir esse objetivo, os laboratórios geralmente estabelecem protocolos experimentais detalhados com uso consistente de reagentes e instrumentos. No entanto, a alteração de um reagente pode se tornar necessária devido à sua descontinuação, alto custo ou acesso limitado, ou porque um novo reagente mais adequado tornou-se disponível no mercado. Infelizmente, tal conversão de reagente pode levar à variabilidade dos dados. Além disso, mesmo lotes diferentes do mesmo reagente podem causar variabilidade dos resultados.¹ Que medidas um laboratório pode tomar para garantir que a conversão de um reagente para outro não afete negativamente a qualidade e a confiabilidade dos dados adquiridos? 

Avaliação cuidadosa das instruções do fabricante

Um novo reagente pode exigir modificações de qualquer uma das etapas envolvidas em seu uso. Por exemplo, pode haver mudanças nas instruções relativas à sua reconstituição, manuseio, armazenamento ou procedimentos experimentais. Assim, é importante revisar cuidadosamente as instruções do fabricante para os reagentes de substituição e garantir que todas as modificações necessárias sejam implementadas adequadamente.

Uso de padrões e estudos cruzados para avaliar o desempenho de novos reagentes

Antes do primeiro uso de um novo reagente ou lote de reagente, recomenda-se comparar seu desempenho com o reagente que você está substituindo. O projeto exato e a extensão dos experimentos de controle dependem do tipo do reagente substituído e da finalidade de seu uso planejado (pesquisa ou diagnóstico). Estudos cruzados são amplamente empregados para comparar o desempenho de um novo lote ou reagente com o usado anteriormente.² Os controles padrão também podem ser incluídos não apenas para verificar a qualidade de novos reagentes e lotes, mas também para monitorar o desempenho de um ensaio regularmente.

Classes de reagentes que apresentam desafios especiais em termos de conversão

A conversão em um novo reagente é especialmente desafiadora para certas classes de reagentes, como anticorpos.³ O projeto e a fabricação de anticorpos são um processo complexo que envolve a identificação de uma sequência confiável de interesse, purificação de alto grau e determinação de especificidade. Portanto, o desempenho de novos anticorpos deve ser assegurado usando controles positivos e negativos apropriados e selecionando as condições experimentais ideais. As linhagens celulares também apresentam desafios especiais porque seu desempenho depende do número de passagens e das condições de cultura. Além disso, uma deriva genética, mau manuseio ou contaminação pode comprometer o desempenho experimental de culturas de células.

Como lidar com resultados inconsistentes após uma conversão de reagente

Se a substituição de um reagente levar a dados inconsistentes ou não confiáveis, a solução de problemas deve abordar vários problemas potenciais. O suporte do fabricante é crucial para resolver problemas relacionados ao próprio reagente. A maioria dos fabricantes fornece recursos online detalhados e suporte pessoal, se solicitado pelos pesquisadores. Além disso, os instrumentos devem ser bem mantidos e reparados regularmente para garantir que não contribuam para problemas experimentais. Finalmente, a possibilidade de um erro de manuseio deve ser considerada e o treinamento e o feedback adequados do pessoal devem ser fornecidos.

Fontes de literatura:

1. Thompson S, Chesher D. Lot-to-Lot Variation. The Clinical Biochemist Reviews 2018;39(2):51-60.
2. Clinical Lab Products. Disponível em: https://clpmag.com/lab-essentials/quality-systems/what-is-an-appropriate-crossover-study-for-a-new-lot-of-qc-for-a-test-that-we-don-t-run-every-day-if-we-aren-t-running-tests-every-day/
3. Tay A. How to Make Your Antibodies Work for Your Lab. Lab Manager. 28-JAN-2022