El papel de los lipopolisacáridos de origen bacteriano en las enfermedades del hígado

Los científicos dedicados al estudio de las enfermedades del hígado han encontrado que hay relación entre estas y las bacterias y productos intestinales. En muchos casos las bacterias patógenas que se encuentran alojadas en el tracto gastrointestinal de un individuo son del tipo Gram negativas, cuya pared celular tiene, entre otros componentes, lipopolisacáridos.

Se considera que una persona con permeabilidad intestinal aumentada, síndrome que también se conoce como intestino agujereado por su nombre en inglés: leaky gut, tienen mayor posibilidad de que penetren toxinas a su organismo y entre estas toxinas, los lipopolisacáridos de origen bacteriano. Este paso de toxinas a través del intestino podría desencadenar algunas de las complicaciones más graves de los pacientes con cirrosis hepática, como es la peritonitis bacteriana espontánea. Los enfermos del hígado no tienen la misma capacidad de detoxificación que las personas sanas, y las bacterias que penetran por la pared intestinal no quedan reducidas en su paso por el hígado por lo que pueden causar entre otras complicaciones la peritonitis. Las bacterias Gram negativas (portadoras de los lipopolisacáridos), son las que más frecuentemente se encuentran en estos casos, principalmente las enterobacterias.

El mejor método para controlar la cirrosis en enfermos con esta enfermedad ya avanzada, es tener un seguimiento de la endotoxemia del paciente. Aunque es difícil detectar la endotoxemia en muestras de sangre, hasta ahora el ensayo que mejor correlaciona las complicaciones y mortalidad, debidas a la cirrosis hepática con la endotoxemia, es el ensayo de LAL (lisado de amebocitos de Limulus). No fue hasta después del 1980 que se pudo constatar una correlación entre los niveles de endotoxemia altos cuantificados por el ensayo de LAL y la cirrosis hepática.

No fueron pocos los inconvenientes que se presentaron para realizar la determinación de endotoxinas bacterianas en muestras de plasma sanguíneo, no obstante el método de LAL sigue siendo el ensayo que permite hacer estas medidas. Incluso cuando ya se habían desarrollado las técnicas colorimétricas y se podía cuantificar el nivel de endotoxinas en otras muestras con resultados bastante fiables, se hacía complejo llegar a realizar el ensayo en sangre con una buena reproducibilidad. Los factores que más influyen en lograr medidas precisas de la endotoxemia en sangre son el pretratamiento de la muestra, la forma de medir las curvas patrón para realizar el análisis y la eliminación de interferentes presentes en el plasma.

Con el test Limulus ES II de Wako, se puede determinar la presencia de endotoxinas en sangre. Este ensayo es específico para endotoxinas y se basa en el método turbidimétrico. Si bien no podría dar un resultado definitivo sobre la endotoxemia asociada a la cirrosis hepática, si puede ser utilizado en laboratorios de investigación donde se estén estudiando diferentes aspectos de esta enfermedad y la influencia de las endotoxinas en la morbilidad de la misma.

Con el test Limulus ES II se puede hacer una medida cuantitativa de la cantidad de endotoxinas presentes en una muestra de plasma sanguíneo. Estas medidas se llevan a cabo mediante el método turbidimétrico cinético, realizando estas a temperatura constante y con el uso de una curva patrón, que se debe obtener en cada ensayo, siguiendo las orientaciones del fabricante. Este test puede usarse acoplado al equipo Toxinometer® ET-6000, que es un sistema computarizado desarrollado por la división LAL de la compañía Wako para cuantificar las endotoxinas bacterianas presentes en diversas muestras.

División LAL de Wako también cuenta con otro tipo de test diseñado para usar en los pocillos de las microplacas, el reactivo PYROSTAR™ ES-F / Plate, que se basa en el mismo principio que el test Limulus ES II, por lo que el método de detección sigue siendo el método turbidimétrico. En ningún caso se debe usar estos test para análisis clínicos, solo en laboratorios de investigación.

Bibliografía:

1. Bellot P, Francés R, Such J., Liver Int., 33, 31–39, 2013.
2. Campillo B, Richardet JP, Kheo T, Dupeyron C., Clin Infect Dis., 35, 1–10, 2002.
3. Fulenwider, J. T., Sibley, C., Stein, S. F., Evatt, B., Nordlinger, B. M., Ivey, G. L., Gastroenterology, 78, 1001-1004, 1980.

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