Potenciales aplicaciones del Cangrejo Herradura en el desarrollo de productos para la salud

El Cangrejo Herradura del Atlántico, como comúnmente se conoce a Limulus polyphemus, ha existido desde hace más de 200 millones de años. Su clasificación se ha ubicado, desde el siglo XIX, en el filo Arthropoda y no en Crustacea como se dispuso inicialmente. Este pariente cercano de los arácnidos se han cosechado históricamente para el uso como fertilizante o cebo, y más recientemente para la extracción de la sangre para el Test del Lisado de Amebocito de Limulus (LAL) utilizado para la detección de endotoxinas bacterianas en productos farmacéuticos y otras aplicaciones médicas.

Limulus polyphemus juega un rol vital en la medicina humana. Es un modelo para el estudio del sistema inmunológico innato. Como invertebrado que no tiene inmunoglobulinas, ha desarrollado un mecanismo único para detectar y responder a los antígenos de la superficie microbiana como los lipopolisacáridos (LPS), ácidos lipoteicoicos, lipoproteínas, peptidoglicanos (PGN) y 1,3-β-glucanos. Esto es la coagulación de la hemolinfa. Las células sanguíneas del Limulus, denominadas amebocitos, se coagulan en presencia de antígenos de superficie microbiana anteriormente mencionados. Dicha reacción de coagulación de la hemolinfa es precisamente el principio bioquímico del denominado Test del Lisado de Amebocito de Limulus (LAL).

Aunque el mayor uso de la prueba LALes para la detección de LPS en productos farmacéuticos, su utilización se extiende a la diagnosis de endotoxemia asociada a cirrosis, cáncer, meningitis, enfermedades oculares, problemas dentales, enfermedades venéreas, infecciones del tracto urinario, así como en análisis de la calidad de aguas. A día de hoy, se continuan encontrando nuevas aplicaciones para la prueba LAL como por ejemplo en la detección de contaminación bacteriana en alimentos incluso en congelados.

Wako Chemicals, una compañía distribuidora de reactivos para la investigación, cuenta con una instalación de sangrado del Limulus polyphemus autorizada por la FDA de EE.UU para la formulación única de un reactivo LAL específico a endotoxina bacteriana sin la interferencia de beta glucanos en las muestras. Esta reconocida compañía a nivel internacional incluye en su catálogo una serie de reactivos y accesorios LAL que cumplen con todas las normas, las regulaciones y los estándares de calidad establecidos por la FDA bajo la marca PYROSTAR™.

Los reactivos PYROSTAR™como el Ensayo Simple de Limulus PS, permiten la detección y cuantificación de endotoxinas sin la interferencia de sustancias coexistentes mediante el uso de un adsorbente de afinidad para la endotoxina denominado Pyrosep™. La serie Pyrostar™ ES-F es una formulación única que contiene Curdlan carboximetilado (CMC) coliofilizado con el LAL con el objetivo de eliminar la interferencia con β-glucanos. Wako fue el primero en utilizar estos hallazgos mediante el desarrollo de un ES-buffer que contiene altas concentraciones de CMC, convirtiendo al reactivo LAL en específico a endotoxina.

Además, los investigadores pueden encontrar Agua libre de endotoxinay Endotoxina estándar de control, Solución extractora de endotoxina para ensayos de LAL para la extracción de endotoxinas que no pueden ser extraídas por el agua o la solución salina, el Toxinometer ET-6000 con el software Toximaster QC7, un lector cinético para un trabajo eficiente y un análisis de datos de alta calidad que puede incorporar los 3 métodos de medición: coágulos de gel, KTA (turbidimétrico)y KCA (cromogénico), entre otros accesorios libres de endotoxina.

Bibliografía:

1) Iwanaga, S. (2007). Biochemical principle of Limulus test for detecting bacterial endotoxins. Proceedings of the Japan Academy, Series B, 83(4), 110-119.

2) Kumar, V., Roy, S., Sahoo, A. K., & Kumar, V. (2016). Horseshoe crabs: biomedical importance and its potential use in developing health-care products. Indian Journal of Geo-Marine Sciences, 45(10), 1234-1244.

3) Smith, D. R., Brockmann, H. J., Beekey, M. A., King, T. L., Millard, M. J., & Zaldivar-Rae, J. (2017). Conservation status of the American horseshoe crab,(Limulus polyphemus): a regional assessment. Reviews in Fish Biology and Fisheries, 1-41.

REACTIVOS LAL PARA PRUEBAS DE ENDOTOXINAS BACTERIANAS:

PYROSTAR™ ES-F Prueba vial única	Ensayo simple de Limulus PS	Kit KY color Limulus