Formas correctas de usar los accesorios LAL
El ensayo de Lisado de Amebocito Límulus (LAL) es un método eficiente para la detección de endotoxinas bacterianas en bacterianas gramnegativas. Se desarrolló en 1960 en base a la reacción de coagulación de la hemolinfa de los cangrejos de herradura atlánticos. Existen una serie de accesorios LAL disponibles para los ensayos de endotoxinas bacterianas, por ejemplo, el sistema de análisis Toxinometer® con el programa de software Toximaster®, placas BioClean®, agua de reactivo de lisado y tubos de reacción y dilución. Todos estos accesorios se fabrican para aportar facilidad y precisión al ensayo LAL.
El Toxinometer® es un lector de tubos de incubación cinética que se puede usar para los ensayos de endotoxinas en una gran variedad de campos y cantidades de muestra. La tasa de la reacción de endotoxinas depende directamente de la concentración de endotoxinas presente en un estándar o una muestra. Por ejemplo, cuanto menor sea la cantidad de endotoxinas presente, más lentamente reaccionará la mezcla de endotoxinas y cuanto mayor sea la cantidad de endotoxinas presente, más rápidamente reaccionará la mezcla. La cantidad de tiempo necesaria para que se produzca la reacción se conoce como el tiempo de reacción.
El sistema de análisis Toxinometer® se puede usar para ensayos:
- Cinéticos turbidimétricos
- Cinéticos cromogénicos
- Gel-clot.
Se pueden obtener resultados de ensayos cinéticos turbidimétricos y de gel-clot para la misma muestra, lo cual permite realizar una correlación directa entre las dos metodologías. El Toxinometer® utiliza el tiempo de reacción medido y el tiempo de reacción de estándares de endotoxinas conocidos para calcular las concentraciones de endotoxinas en una muestra. Usa la tasa de turbidez o el aumento de la intensidad del color para calcular los tiempos de reacción dependiendo de si el ensayo realizado es turbidimétrico y cromogénico. Está diseñado para realizar ensayos con facilidad. El sistema de análisis Toxinometer® está operado por ordenador, se puede expandir fácilmente (módulos de extensión disponibles para extender el número de muestras) y tiene una facilidad de uso excepcional. El uso del Toxinometer® en vez de un lector de microplacas disminuye considerablemente el riesgo de contaminación. El Toxinometer® puede ensayar mediante reactivos multi-ensayo y de ensayo único y tiene la capacidad de realizar un nuevo ensayo mientras se está realizando otro ensayo. Esto permite al usuario iniciar los análisis inmediatamente. Como característica adicional, permite el archivado de curvas estándar, el ajuste de temperatura variable y la medición de hasta 16 muestras simultáneamente.
El sistema de análisis Toxinometer®, conocido como el ET-6000, viene con un portátil dedicado precargado con el paquete de software Toximaster® QC7 junto con los cables de alimentación, fusibles adicionales, conectores USB, una tapa para la zona fotométrica, un soporte de los tubos de reacción, documentos de validación y manual de instrucciones. La herramienta de gestión del usuario QC 7 está diseñada con un inicio de sesión individual para controlar el acceso al programa Toximaster®.
Al inicio del programa aparecerá una ventana con cuatro opciones:
- Colocar la muestra e iniciar la medición
- Iniciar ahora la medición
- Cargar el protocolo iniciar la medición
- Ver datos de mediciones.
Las teclas de editar, cargar y guardar protocolos se pueden ver fácilmente en la barra de herramientas. Existen cuatro grupos de opciones para ensayos con múltiples opciones de tipo de muestra de entre las que elegir. La información de la muestra también se puede personalizar según los requisitos del ensayo. El programa también proporciona la opción de ajustar los parámetros, generar gráficas para muestras únicas o múltiples, dibujar curvas estándar, generar informes de grupo y permitir impresiones. Las impresiones incluyen toda la información relevante. El identificador de muestra, tiempo de activación, tiempo transcurrido, señal de diferencia de luz y tasa de transmisión de luz se pueden ver en cualquier momento para todas las muestras. Las muestras que no coagulan durante el ciclo muestran una luz blanca al lado de la posición de muestra, mientras que la luz amarilla al lado de una posición de muestra indica que la muestra continúa coagulando. Las muestras que han coagulado durante el ciclo de tiempo emitirán un sonido y se mostrará una luz roja en la posición de muestra. Esto indicará que el ensayo ha finalizado.
FUJIFILM Wako Chemicals también ofrece puntas de pipetas sin endotoxinas, tubos de ensayos y tapas de aluminio, reactivos PYROSTAR™ ES-F en configuraciones de ensayo único y multi-ensayo, endotoxinas estándar de control, Límulus Color KY en configuraciones de ensayo único y multi-ensayo (para el ensayo cromogénico) y agua de reactivo de lisado para acompañar el uso del sistema de análisis Toxinometer®. Además, el programa de software Toximaster® cumple la parte 11 del 21CFR. Se espera el lanzamiento de la serie Toxinometer ET-7000 en 2019.
ALGUNOS KIT DE REACTIVOS LAL:
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| PYROSTAR ES-F Plate con CSE | Kit de 100 PYROSTAR™ ES-F (2 ML) (sin CSE) | Solución extractora de endotoxina |