¿En qué casos se usan los ensayos de LAL?

En ensayo de LAL (acrónimo del Lisado de Amebocito Límulus) es el método más popular para cuantificar las endotoxinas bacterianas. Las endotoxinas son liposacáridos que pueden desencadenar una reacción inmunológica nociva si entran en el cuerpo humano. Por esta razón, las endotoxinas deben controlarse minuciosamente para garantizar que los niveles no superan los umbrales de seguridad. Gracias a su fiabilidad y su bajo coste, el ensayo LAL se aplica en numerosos casos para la detección de endotoxinas.

Medicamentos

Las endotoxinas son una preocupación común en la fabricación de medicamentos. Dado que el agua es el ingrediente principal de muchos medicamentos, las bacterias transmitidas por el agua presentan un riesgo de introducir endotoxinas. También es necesario la presencia de bacterias para fabricar ciertos medicamentos, como para la síntesis de péptidos, y por lo tanto sus endotoxinas deben eliminarse de los productos. Incluso tras la esterilización, las endotoxinas siguen estando presentes debido a su gran resistencia al calor.

La FDA ha establecido directrices estrictas sobre los niveles de endotoxinas en los productos farmacéuticos. Las directrices varían dependiendo del tipo y la dosis del medicamento. Por ejemplo, los medicamentos para inyecciones intrarraquídeas tienen un límite máximo permitido de 0,2 unidades de endotoxinas (EU) por kg. Las empresas de fármacos suelen usar el ensayo de LAL para confirmar que los niveles de endotoxinas quedan dentro de límites seguros.

Dispositivos médicos

De la misma forma que los medicamentos, la FDA requiere que los dispositivos médicos mantengan los niveles de endotoxinas bajo el límite de seguridad. Para la mayoría de productos, el máximo permitido es de 0,5 EU por ml de extracto del dispositivo. Debe comprobarse la presencia de endotoxinas en todos los dispositivos médicos que puedan entrar en contacto con tejidos o fluidos humanos, como las sondas, los marcapasos y los tubos de diálisis.

Para comprobar la presencia de endotoxinas, los dispositivos médicos deben enjuagarse mediante una solución de extracción. Tradicionalmente se ha utilizado agua o solución salida, pero estudios recientes han demostrado que esto permite que ciertas sustancias como los metales, aminoácidos o encimas interfieran con el ensayo de LAL. La solución de extracción de endotoxinas de FUJIFILM Wako evita este problema y permite una extracción robusta y eficiente de las endotoxinas. La solución es especialmente efectiva para dispositivos que pueden entrar en contacto con fluidos que contienen sangre o proteínas.

Hospitales

Los hospitales también dependen del ensayo LAL para detectar endotoxinas. El agua utilizada para enjuagar dispositivos médicos reutilizables, como los equipos quirúrgicos, puede ser una fuente potencial de contaminación por endotoxinas. Los kits cromogénicos de LAL como la serie Limulus Color KY son ideales para el hospital dada su gran sensibilidad y facilidad de uso. Este kit permite la detección de endotoxinas en formato de un único tubo o microplaca y es resistente a los resultados de falsos positivos por hongos glucanos.

Investigación en laboratorios

Además de por su toxicidad a los humanos, las endotoxinas crean problemas en los entornos de investigación en laboratorios. Las endotoxinas pueden interferir con el crecimiento y la función de los cultivos de células, particularmente las células inmunológicas, y pueden causar reacciones inflamatorias en animales de laboratorio. La contaminación se puede producir de una serie de fuentes como el agua, los sueros, los reactivos de cultivos de células y los materiales de plástico y cristal. Para evitar la contaminación por endotoxinas, FUJIFILM Wako ofrece una serie de productos libres de endotoxinas en la serie BioClean®, que incluye puntas de pipeta, tubos de ensayo y tapas.

ALGUNOS KIT DE REACTIVOS LAL:

Ensayo simple de Limulus PS	Kit de 4 PYROSTAR™ ES-F (5.2 ML) con CSE	PYROSTAR™ ES-F Prueba vial única