¿Dónde y por qué se realiza la Prueba LAL?
La prueba LAL acrónimo de (Limulus Amebocites Lisate) es un ensayo de determinación de endotoxinas bacterianas usando un lisado de amebocitos del cangrejo Limulus. En esta prueba se aprovechan las reacciones que ocurren en el lisado de amebocitos, como consecuencia de un mecanismo de defensa del cangrejo en presencia de endotoxinas, y que terminan con un proceso de gelificación. Estas pruebas tienen como mecanismos de detección, por ejemplo la aparición del gel o cambios de color que suceden cuando se añade un cromóforo en el medio para que ocurra un cambio de color asociado a las reacciones desencadenadas por las endotoxinas.
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Las pruebas de LAL se nombran según el mecanismo de detección, como método Gel Clot, método Cromogénico o método Turbidimétrico. A su vez estos métodos pueden ser usados de manera cualitativa, cuando el interés del ensayo es conocer si hay endotoxinas bacterianas en un medio, o de forma cuantitativa, cuando se necesita saber la concentración de endotoxinas bacterianas presentes.
La prueba LAL se realiza en diversos entornos como pueden ser la industria farmacéutica, las fábricas de dispositivos médicos, los hospitales o los centros de investigaciones. En la producción de medicamentos, y más específicamente los que van a ser administrados por vía parenteral, es de suma importancia controlar la presencia de endotoxinas bacterianas, pues en caso de que el fármaco contenga toxinas estas llegarían directamente al torrente sanguíneo del animal o persona al que sea administrado. La prueba LAL se lleva a cabo, como método de control de pirógenos en todas las etapas de producción de los fármacos y productos biológicos, siendo la prueba de elección desde la década del 80 para controlar la calidad de estos productos. Los ensayos clínicos que se realizan con el fin de determinar la presencia de endotoxinas también usan la prueba de LAL como método de detección de las endotoxinas.
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La necesidad de realizar la prueba LAL radica en la toxicidad de las endotoxinas bacterianas. Estas toxinas presentes de manera endógena en las bacterias Gram negativas, al formar parte de la membrana de las mismas, se liberan al medio cuando ocurre la muerte de las bacterias. Las endotoxinas bacterianas son peligrosas para los mamíferos, causan infecciones que en muchos casos pueden ser mortales. Debido a la gran resistencia de estas toxinas es necesario realizar la prueba de LAL en diversos medios y tener muy controlados todos los ambientes donde se puedan propagar.
La división LAL de Wako ofrece diferentes productos para llevar a cabo la prueba LAL por los distintos métodos por los que se realiza este ensayo. El Kit KY color Limulus es la prueba de Wako para determinar endotoxinas por el método cromogénico, este ensayo puede realizarse mediante el método del punto final o el método cinético. El método turbidimétrico se utiliza en los Kits ES-F en los formatos que tiene Wako a disposición de los clientes (Test Limulus ES-2 y el PYROSTAR™ ES-F/Plate). Mientras que el Test Limulus ES II de Wako se basa en el método Gel Clot. Con la adecuada selección de estos kits se puede realizar la determinación de endotoxinas en los diferentes medios.
